產品展示 / products 您的位置:網站首頁 > 產品展示 > 試劑 > 磁珠 > YCSW-L1004Protein A/G Magnetic Beads 磁珠
產品分類

Product category

相關文章

Related articles

Protein A/G Magnetic Beads 磁珠

Protein A/G Magnetic Beads 磁珠

簡要描述:Protein A/G Magnetic Beads 磁珠:免疫沉澱係列

瀏覽量: 62

所屬分類:磁珠

更新日期:2020-07-30

廠商性質:經銷商

詳情介紹
品牌自營品牌規格1ml/5ml
供貨周期現貨主要用途蛋白免疫沉澱
應用領域生物產業

Protein A/G Magnetic Beads 磁珠

Protein A/G磁珠在大小為0.2 um的納米磁珠上共價結合了大量的Protein A/G蛋白,與傳統的Protein A/G免疫沉澱瓊脂糖凝膠比較,抗體結合能力相同,背景更低的特點,由於采用磁性分離,使得每次IP和CoIP可以節省40%的時間。

名稱

特性

磁珠大小

0.2 μm

磁珠濃度

10 mg/mL

IgG 結合量

0.5 mg/mL

適用範圍

IP,CoIP等

穩定性

pH 6-8, 4oC長期穩定

儲存條件

4oC

Protein A/G Magnetic Beads 磁珠儲存條件

pH 6-8, 4oC長期穩定,禁止產品凍結。

Protein A/G Magnetic Beads 磁珠使用說明

1. 樣品製備

請根據不同的樣品選擇合適的處理方法:

樣品

樣品處理

 

血清

若目標蛋白豐度較高,建議用結合緩衝液稀釋血清樣品至目標蛋白終濃度為10~100   µg/mL,置於冰上備用(或置於-20℃長期保存)。

 

 

懸浮細胞

離心收集細胞(4oC, 500 g, 10min),棄上清後稱重,按每毫克細胞50µL的比例用1× PBS洗滌 2次;按每毫克細胞5~10 µL的比例加入結合緩衝液,同時加入蛋白酶抑製劑,混勻後置於冰上處理10min;離心收集上清液(4oC, 12000g,10min),置於冰上備用(或置於-20oC長期保存)。

 

 

貼壁細胞

移去培養基,按每 1.0×105個細胞150 µL的比例用1×PBS洗滌兩次;用細胞刮棒刮脫細胞,收集至1.5 mLEP管內,按每 1.0×105個細胞20~30 µL的比例加入結合緩衝液,同時加入蛋白酶抑製劑,混勻後置於冰上處理10min,離心收集上清液(4oC, 12000g,10min), 置於冰上備用(或置於-20oC長期保存)。

 

 

大腸杆菌

離心收集大腸杆菌(4oC,12000g,2min),棄上清後稱重,按每克(濕重)菌體10 mL的比例用1×PBS洗滌2次;按每克(濕重)菌體5~10 mL的比例加入結合緩衝液,同時加入蛋白酶抑製劑(如終濃度為1 mM的PMSF),重懸菌體,超聲裂解細胞,離心收集上清(4oC,12000g,10min)。

2. 磁珠預處理:

將磁珠充分混勻,取25~50 µL磁珠,400 µL結合緩衝液洗滌3次,棄上清。

3. 抗體與磁珠結合:

3.1 抗體稀釋:結合緩衝液稀釋抗體至終濃度為5~50 µg/mL,置於冰上備用。

3.2 抗體結合:將準備好的400 µL抗體加入準備好的磁珠中,置於翻轉混合儀孵育(常溫30 min,4℃,2 h),後進行磁性分離,收集上清液置於冰上以備後續檢測。

3.3洗滌(Washing):400 µL結合緩衝液洗滌3次,每次10min。

*注意:結合過程中,磁珠可能會出現聚團或呈片狀,屬於正常現象 ,不會影響實驗結果。

4. 抗原與抗體-磁珠複合物結合

4.1 加入400 µL步驟1準備的樣品,置於翻轉混合儀(常溫30 min,4℃,2 h)。

4.2 洗滌(Washing):400 µL結合緩衝液洗滌4次,每次5min。

4.3 洗脫(Elution):本操作說明書提供以下兩種抗原洗脫方案,操作者可根據後期檢測的需要選擇不同的抗原洗脫方法。

4.3.1 變性洗脫法:此方法洗脫的樣品適用於SDS-PAGE檢測。分離磁珠,棄上清,向磁珠中加入60 µL 1× SDS-PAGE Loading Buffer混合均勻,100℃加熱10min。分離磁珠,收集上清,進行SDS-PAGE檢測。

4.3.1非變性洗脫法:此方法洗脫的樣品保持原有的生物活性,可用於後期功能分析。分離磁珠,棄上清,向磁珠中加入25-50 µL洗脫緩衝液,室溫孵育10 min;分離磁珠,收集上清液至新的EP管,並立即加入1 µL中和緩衝液將洗脫產物pH調節至中性,用於後期功能分析。



留言框

  • 產品:

  • 您的單位:

  • 您的姓名:

  • 聯係電話:

  • 常用郵箱:

  • 省份:

  • 詳細地址:

  • 補充說明:

  • 驗證碼:

    請輸入計算結果(填寫阿拉伯數字),如:三加四=7

聯係黄瓜影院污免费

contact us

谘詢電話

17321241593

掃一掃,關注黄瓜影院污免

返回頂部